脓毒症，是一种由感染引发的危及生命的器官功能障碍疾病，严重威胁着人类健康。据统计，全球每年新增脓毒症患者数量众多，且死亡率居高不下。在脓毒症的诊断与治疗过程中，准确评估病情严重程度和预后至关重要。近年来，肝素结合蛋白（HBP）作为一个关键指标，受到了广泛关注，而流式细胞术则为评估HBP在脓毒症中的表达提供了有力手段。

HBP：脓毒症评估的关键指标

HBP是机体激活中性粒细胞嗜酸颗粒释放的蛋白分子。《中国脓毒症早期预防与阻断急诊专家共识》显示，脓毒症患者IL-6水平正常或轻度升高时，HBP已明显升高，其诊断脓毒症准确率高于其他细胞因子，在严重细菌感染早期诊断意义重大。当HBP临界值设为28.1ng/mL，诊断感染进展为脓毒症的敏感度达84.9%，特异度78.3%，曲线下面积0.893。

临床研究证实，HBP对严重脓毒症、脓毒性休克及器官功能障碍预测作用显著。针对疑似感染患者的研究表明，HBP临界值≥15ng/mL时，鉴别严重脓毒症、脓毒性休克的敏感度87.1%，特异度95.1%。患者出现休克前12小时，HBP水平即开始升高。对比其他标志物，HBP诊断严重脓毒症的曲线下面积最大，敏感度78%，特异度95%，是预测器官功能障碍进展的重要指标。HBP升高的感染患者，90%会进展为严重脓毒症；HBP阴性患者，89.5%病情可控，可见HBP可作为早期预测及72小时内预后判断指标。

流式细胞术：精准检测的有力工具

流式细胞术是一种在液流系统中，对单个细胞或细胞器的生物学性质进行快速测定，并将特定细胞或细胞器从群体中分类收集的技术。其原理是，将待测样品（如细胞、染色体、精子或细菌等）经荧光染料染色后制成样品悬液，在一定压力下通过壳液包围的进样管进入流动室，排成单列的细胞由流动室的喷嘴喷出成为细胞液流，并与入射激光束相交。细胞被激发产生荧光，由特定的光学系统收集。光学系统中的阻断滤片阻挡激发光，二色分光镜及其他阻断滤片选择荧光波长，荧光检测器为光电倍增管，散射光检测器是光电二极管，用以收集前向散射光，小角度前向散射与细胞大小有关。整个仪器用多道脉冲高度分析器处理荧光脉冲信号和光散射信号，测定结果用单参数直方图、双参数散点图、三维立体图和轮廓（等高）图来表示。

在细胞分选方面，超声振荡器产生高频振荡，使流动室振动，将喷嘴喷出的细胞液流断裂成一连串均匀小液滴，有的液滴含有细胞。在细胞形成液滴前，光学系统已测定其信号，若信号符合选定要分选的细胞性质，在该细胞刚形成液滴时，仪器给整个液流充以短暂正或负电荷。带有正电或负电的液滴通过高压偏转板时发生偏转，从而实现细胞分类收集。

流式细胞术具有诸多优势，其能快速测定细胞DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数，可进行多参数分析，同时测定一个细胞的多种性质，如散射光和荧光，或多种不同颜色的荧光。例如细胞经吖啶橙染色后，DNA发绿色荧光，RNA发红色荧光，测定这两种荧光就能同时得知一个细胞内的DNA和RNA含量。此外，流式细胞术还可测定细胞周期各时相细胞的百分比，鉴别死细胞和活细胞，定量测定细胞表面和内部的受体等。

流式细胞术评估HBP在脓毒症中的应用

在脓毒症研究中，通过流式细胞术，可以精准测定脓毒症患者体内细胞中HBP的表达水平，为脓毒症的早期诊断、病情监测和预后评估提供关键依据。在检测疑似脓毒症患者时，运用流式细胞术分析相关细胞内HBP表达，若发现HBP水平显著升高，结合其他临床症状，可更早更准确地判断患者是否患有脓毒症，为及时治疗争取宝贵时间。在治疗过程中，持续使用流式细胞术监测HBP表达变化，能直观反映治疗效果。若HBP水平逐渐下降，表明治疗方案有效，病情得到控制；反之，若HBP水平持续居高不下或进一步上升，则提示可能需要调整治疗策略。

HBP作为脓毒症的关键指标，其在流式细胞术检测下的精准表达分析，能够帮助临床医生更早地识别脓毒症患者，及时制定合理的治疗方案，并在治疗过程中动态监测病情变化，从而提高脓毒症患者的救治成功率，改善患者的预后。